關于方法適用性：沒有一種方法適合所有應用，測試方法選擇基于特定產(chǎn)品的具體情況。對于給定產(chǎn)品的生命周期，通常采用超過1種方法。

● 關于方法適用性：產(chǎn)品包裝的小差異可能允許一種方法適用于多個產(chǎn)品包裝。

●關于方法的選擇：包裝存在分壓差但不存在絕壓差的情況下，可以用示蹤氣監(jiān)測法判斷泄漏；包裝存在絕壓差的情況下，可以通過監(jiān)測頂空絕壓隨時間變化來判斷泄漏。

● 關于方法的選擇：抽真空時產(chǎn)品成分固化可能會堵塞漏孔，使得真空衰減無效，此時可以考慮用高壓放電法，前提是液體產(chǎn)品比包材更導電。

●關于方法的選擇：鋁箔包裝可能證實與高壓放電法不兼容，高壓放電法適用于相對不導電的包裝材料。然而，西林瓶的鋁蓋對高壓放電法沒有妨礙，甚至可以用于查找西林瓶封口的泄漏。

● 關于方法的干擾因素：在某些情況下，包裝內(nèi)容物會干擾方法檢測最小泄漏的能力。如蛋白質(zhì)成分或鹽類可能堵塞漏孔，阻礙了真空衰減法或質(zhì)量提取法的氣體流動使得不能檢出。因此，要很謹慎理解產(chǎn)品對所選方法的潛在干擾，包括在包裝裝配好的最初時間及后續(xù)時間。

●關于微生物和液體侵入：液體在0.1um開始侵入，微生物在0.3um開始侵入。

● 關于最大可允許泄漏限值：如果產(chǎn)品不僅要求無菌，還要求頂空氣保留，那么此類產(chǎn)品的最大可允許泄漏限值要求更嚴格，同時還要考慮包裝的阻隔性。

● 關于最大可允許泄漏限值：硬質(zhì)容器最大可允許泄漏限值可以采用0.1-0.3um，軟包裝最大可允許泄漏限值沒有指明具體的漏孔。

●關于泄漏級別：要求包裝絕對不漏是不切實際的，而是需要考慮與產(chǎn)品質(zhì)量有關的泄漏級別，也就是說，不應當允許包裝泄漏超過產(chǎn)品的最大可允許泄漏限值，此類泄漏應當不存在。

● 關于泄漏引發(fā)的產(chǎn)品質(zhì)量風險：由所關心的泄漏引發(fā)的產(chǎn)品質(zhì)量風險包括3類：微生物侵入導致的產(chǎn)品無菌風險；液體或固體的侵入導致產(chǎn)品理化質(zhì)量風險；頂空氣含量改變導致產(chǎn)品理化質(zhì)量風險或阻礙產(chǎn)品被終端客戶使用。

● 關于特衛(wèi)強包裝檢漏：特衛(wèi)強包裝不屬于USP1207章節(jié)包含的范圍。

● 關于暫時性泄漏的檢測：膠塞容器在超低溫冷藏過程中可能發(fā)生泄漏，此時可以通過監(jiān)測頂空條件（頂空氣含量、頂空壓力）來反映包裝完整性。

● 關于包裝工藝和裝配驗證階段的檢漏：對于一些產(chǎn)品包裝，適合包裝加工和裝配驗證階段的完整性測試方法的檢出限要高于最大可允許泄漏限值，能夠檢出大漏的方法都是合適的。

●關于包裝開發(fā)階段的檢漏：包裝開發(fā)階段在一些情況下，內(nèi)在包裝完整性確認可以采用空包及靈敏的測試方法，這樣就沒有產(chǎn)品配方干擾測試方法的風險。

● 關于軟包裝的檢漏：軟包裝需要專門的腔體以限制包裝膨脹，防止破損。

● 關于預充針的檢漏：預充針的柱塞需要限制以防止壓差下移位。

● 關于頂空保護產(chǎn)品的檢漏：對于包裝需要頂空保護的產(chǎn)品，對于穩(wěn)定性研究的完整性測試適合確認特定的頂空氣或負壓隨時間的存在，滿意的結(jié)果需確認泄漏的不存在。

● 關于包裝封口工藝：對于某些需要保持產(chǎn)品理化穩(wěn)定性的產(chǎn)品，包裝需要保持惰性氣體頂空/低水汽含量，在常壓下或負壓下封口，頂空真空度條件也有利于產(chǎn)品使用，如產(chǎn)品重構(gòu)。

● 關于真空度/惰性氣體/水汽檢測：真空封口的需要隨時間檢查真空度，惰性氣體封口的需要隨時間檢查活性氣體或水汽含量的增加。

● 關于抽樣檢測數(shù)量：測試生產(chǎn)批次樣品可以提供包裝完整性的確認，而采用無損方法進行的整體測試則能獲得完整性保證的持續(xù)性評估。在一些情況，法規(guī)要求中指明了測試數(shù)量；對于其他的產(chǎn)品包裝，產(chǎn)品測試數(shù)量取決于驗證階段的統(tǒng)計過程控制結(jié)果，之后是基于日常生產(chǎn)中產(chǎn)品質(zhì)量趨勢分析。

● 關于滅菌對密封性的影響：要確保加工條件（如多個滅菌循環(huán)）不會物理損壞材料，進而導致負面影響包裝完整性。

● 關于軟包裝的檢漏：軟包裝需要專門的腔體以限制包裝膨脹，防止破損。

● 關于預充針的檢漏：預充針的柱塞需要限制以防止壓差下移位。

● 關于多次給藥包裝的檢漏：多次給藥包裝采用理化和微生物方法，膠塞多次給藥包裝采用色水法。

● 關于包裝開發(fā)階段的檢漏：在產(chǎn)品包裝開發(fā)過程中，可以采用一連串的完整性和封口質(zhì)量測試方法，開始時采用能夠測試產(chǎn)品內(nèi)在包裝完整性的技術，可行的包裝系統(tǒng)的內(nèi)在包裝完整性符合產(chǎn)品最大可允許泄漏限值。

內(nèi)在包裝完整性確認的測試包裝數(shù)量可能不同，根據(jù)

1）產(chǎn)品包裝的復雜性；

2）URS的細節(jié)；

3）制造商的先前經(jīng)驗 。

測試數(shù)量的選擇受到對包裝完整性測試結(jié)果的信心以及所期望的完整性保證的水平的影響。在一些情況下，內(nèi)在包裝完整性確認可以采用空包或空白填充的容器密閉系統(tǒng)更容易更經(jīng)濟的確認，從而使得可以有更大的樣品數(shù)量可以被靈敏及定量的檢漏方法測試，這樣就沒有產(chǎn)品配方干擾測試方法的風險。

內(nèi)在包裝完整性需要考慮包裝裝配因素的情況。

● 關于包裝加工和裝配驗證階段的檢漏：包裝加工和裝配驗證研究的完整性測試方法的目的是確認包裝持續(xù)符合產(chǎn)品最大可允許泄漏限值。對于一些產(chǎn)品包裝，適合包裝加工和裝配驗證階段的完整性測試方法的檢出限要高于最大可允許泄漏限值，能夠檢出大漏的方法都是合適的。

● 關于產(chǎn)品生產(chǎn)階段的檢漏（關于抽樣量）：測試生產(chǎn)批次樣品可以提供包裝完整性的確認，而采用無損方法進行的整體測試則能獲得完整性保證的持續(xù)性評估。在一些情況，法規(guī)要求中指明了測試數(shù)量；對于其他的產(chǎn)品包裝，產(chǎn)品測試數(shù)量取決于驗證階段的統(tǒng)計過程控制結(jié)果，之后是基于日常生產(chǎn)中產(chǎn)品質(zhì)量趨勢分析。

真空下封口的產(chǎn)品需要合適的包裝裝配驗證以及補充測試確認隨著測試時間真空度的保留；類似的，需要特定的惰性氣體頂空的包裝完整性保證是基于合適的包裝裝配驗證以及測試活性氣體或水汽含量隨時間的增加。

● 關于穩(wěn)定性研究階段的檢漏：理想來說，用來支持市場產(chǎn)品穩(wěn)定性研究所選擇的包裝完整性測試能夠確認給定產(chǎn)品包裝系統(tǒng)最小的泄漏不存在。也就是說，產(chǎn)品的最大可允許泄漏限值落在所選方法檢漏范圍內(nèi)。然而，適用于特定產(chǎn)品包裝系統(tǒng)的方法可能不能檢測最小的泄漏。某些情況下，包裝內(nèi)容物會干擾方法檢測最小泄漏的能力。

對于包裝需要頂空保護的產(chǎn)品，對于穩(wěn)定性研究的完整性測試適合確認特定的頂空氣或負壓隨時間的持續(xù)存在，滿意的結(jié)果需確認可能危害產(chǎn)品無菌以及相應的理化質(zhì)量特性的泄漏的不存在。用于監(jiān)測等同于微生物阻隔保證以及防止液體產(chǎn)品損失的容器真空度或頂空氣含量保持所需的持續(xù)時間可以根據(jù)氣體流動動力學進行預測，如果有一個足夠大的會允許微生物侵入和產(chǎn)品配方損失的泄漏通道存在時。

對于市場的產(chǎn)品，用于包裝完整性評估的穩(wěn)定性測試樣品保存在有標簽的存儲條件下。對于每個時間點所選擇的測試樣品數(shù)量是相關的和足夠代表穩(wěn)定性測試目的，這指示了是否完整性受到穩(wěn)定性條件的影響。樣品數(shù)量選擇考慮到所有先前的開發(fā)和驗證測試。

● 關于確定性方法：確定性方法大多依賴差壓或分壓測試，高壓放電法依賴漏孔附近液體的存在，而不是液體的流動。

● 關于概率性方法：概率性方法 樣品數(shù)量和測試條件嚴格性與漏孔大小反相關。

●關于確定性方法和概率性方法的選擇：能夠檢測出產(chǎn)品最大可允許泄漏限值的確定性方法是的，當建立內(nèi)在包裝完整性時。如果測試樣品數(shù)量有限，也可以選擇確定性方法，當檢測很少出現(xiàn)的所關心的泄漏或當不能找到給定漏孔或泄漏類型的潛在的風險太大時。當方法結(jié)果需要特定的概率性方法時，概率性方法適合。

● 關于理化方法：理化方法包含確定的方法和概率的方法。

● 關于方法結(jié)果：

▼方法結(jié)果包括漏孔的存在、漏孔定位、泄漏率測試、液體侵入、微生物侵入。

▼漏孔定位包括高壓放電、氣泡、示蹤氣嗅探模式、一些液體示蹤法。

▼整體包裝泄漏率測試的方法包括激光、質(zhì)量提取、壓力衰減和真空衰減、示蹤氣真空模式。

● 關于方法結(jié)果：沒有一種方法可以提供上升提到的5種方法結(jié)果。

● 關于定量和定性：當方法考慮允許時，選定量的方法。

● 關于無損和破壞：示蹤氣和壓力衰減法如果引入示蹤氣或加壓氣到包裝中引起包裝阻隔性被破壞被認為是破壞的方法，高壓放電法如果證實電流暴露對產(chǎn)品沒有損壞，也是無損的，很少的情況下，暴露會引起頂空臭氧形成，引起產(chǎn)品氧化。

●關于離線和在線：離線設備測試速度慢，通常比在線設備更靈敏。在線設備可以提供所有包裝完整性的更大保證，當出現(xiàn)包裝誤裝配或破壞時，可以產(chǎn)生即時的反饋，使得可以在產(chǎn)線實時更正。在線設備限制了方法的檢出能力。此外，由于產(chǎn)品泄漏導致的儀器停工或儀器故障是個重要的考慮。

● 關于設備確認：設備確認的作用包括：

1）評估設備的功能；

2）采用合適的校驗工具或參考的標準物質(zhì)來模擬有漏的測試條件以確定設備的檢出能力。

●關于準確度：準確度即正確區(qū)分陽性樣品和陰性樣品的能力，準確度提供了假陽性和假陰性發(fā)生率的信息。對于定量測試氣體泄漏率或氣體濃度或氣體壓力的方法，準確度是方法產(chǎn)生一個與真實標準物質(zhì)相當?shù)慕Y(jié)果的能力。如氦檢法是直接測試氦氣泄漏率，準確度是儀器讀數(shù)與經(jīng)認證的國家認可的可追溯標準物質(zhì)的泄漏率的接近程度。

● 關于精密度：精密度是方法能夠產(chǎn)生可靠、可重復數(shù)據(jù)的能力，包含重復性、可靠性、再現(xiàn)性。

● 關于特異性：特異性是方法能準確區(qū)分陰性樣品和陽性樣品的能力，盡管有干擾因素可能會引起假檢出。如氦檢法，氦氣通過包裝壁滲透可能會掩蓋小漏或可能出現(xiàn)假陽性的結(jié)果。

● 關于假陽性和假陰性：微漏檢測的挑戰(zhàn)是潛在的干擾因素被誤認為是泄漏，如真空衰減法包裝材料脫氣、測試系統(tǒng)水汽、包裝膨脹可能會認為是泄漏。另外，檢漏信號的不存在也可能被誤認為是不漏。

● 關于檢出限的確定：任何方法都可能出現(xiàn)假陰性和假陽性結(jié)果，因此，檢出限的確定是通過比較陽性樣品讀數(shù)和陰性樣品的讀數(shù)來實現(xiàn)。檢出限的確定由隨機次序混合的陰性樣品和陽性樣品組成。

● 關于檢測范圍：如果要建立檢測范圍，需包含大漏的對照樣品。有的方法能夠檢測的漏孔很小，但沒有相應的陽性樣品的例子，如氦檢法。

● 關于檢出限：氦檢的檢出限采用泄漏率標準物質(zhì)引入泄漏到測試系統(tǒng)來確認，激光法的檢出限可以基于氣體流動動力學進行數(shù)學預測。

● 關于定量限：激光法可以評估定量限，而大多數(shù)方法檢出限更有意義。

●關于線性：激光法和示蹤氣法的數(shù)據(jù)分別具有線性關系，真空衰減法等也與漏孔相關，但很少用于漏孔或泄漏率定量。高壓放電法和所有的概率法不驗證線性。

● 關于大漏檢測：能夠測試微漏的方法可能會遺漏大漏

●關于大漏檢測：對于具有測試漏孔范圍的方法，在驗證中需要確認大漏的檢測能力。

● 關于可靠性：可靠性是方法能準確區(qū)分漏與不漏樣品的能力，盡管參數(shù)有小的差異，在日常使用中用于判斷方法適用性。評價可靠性的方法是采用最佳的或普通的參數(shù)來進行測試。

● 關于系統(tǒng)適用性測試：系統(tǒng)適用性即性能確認測試 ，是采用master加有流量和沒流量時進行確認，在測試開始和結(jié)束時執(zhí)行。

● 關于與微生物侵入比較：盡管理解理化方法的檢測能力與微生物侵入風險之間的關系很重要，但在所有情況下進行實驗比較可能不需要或沒有用。在方法驗證時，沒必要與微生物侵入（或液體泄漏）做比較的情況包括：

1）經(jīng)驗證的理化方法證實檢出限在或低于產(chǎn)品包裝最大可允許泄漏限值。

2）經(jīng)驗證的理化方法用于查找大漏。

●關于與微生物侵入比較：在方法驗證時，有必要與微生物侵入（或液體泄漏）做試驗比較的情況包括：

1）經(jīng)驗證的理化方法用于確認密閉容器的內(nèi)在包裝完整性，但方法的檢出限顯著高于最大可允許泄漏限值。如經(jīng)氦質(zhì)譜測試的包裝最大可允許限值是0.2um，但產(chǎn)品填充包裝穩(wěn)定性研究所選的方法檢出限是3um，那么微生物侵入（或液體泄漏）與漏孔大小關系的研究，可以幫助提供微生物在該方法檢出限侵入的可能性，因此可以提供對穩(wěn)定性泄漏測試識別泄漏能力的理解。

2）經(jīng)驗證的理化方法用于確認包裝的內(nèi)在完整性，但最大可允許泄漏限值或缺乏或沒有被定義。那么比較微生物侵入（或液體泄漏）風險與漏孔大小關系的研究對該理化方法檢測可能性是有用的。

● 關于系統(tǒng)適用性：一些方法的系統(tǒng)適用性檢查采用陰性對照和陽性對照。 Master作為模擬不漏的包裝，經(jīng)常用于系統(tǒng)適用性測試以確認系統(tǒng)性能，如真空衰減或質(zhì)量提取法。

● 關于缺陷創(chuàng)建方法（陽性樣品制備）：

▼ 在包裝壁上鉆孔的干擾是小漏孔可能被產(chǎn)品配方堵塞在真空衰減法等方法中。激光鉆孔的優(yōu)勢是真實的缺陷（如裂縫），且不需要引入外來物質(zhì)，如金屬絲、軟管或膠水。當前，在硬質(zhì)玻璃或塑料組件的激光打孔可以小至2-3um，在軟包裝更厚的壁上是5-10um，更小的孔容易因操作、環(huán)境雜質(zhì)、軟包裝壁變形等堵塞。

▼ 玻璃微型移液器可以用來模擬單個的漏孔，小至0.1um，其漏孔可以采用空氣流量法進行標定，微型移液器的使用挑戰(zhàn)是要保證移液器周邊和包裝壁*密封，且要避免破損。此外，空氣可能會干擾依賴液體的流動的方法測試。

▼ 微型毛細管的橫截面直徑可以窄至2um，它通常用于替代更小鉆孔、更短長度的泄漏通道當執(zhí)行依賴氣體流動檢漏測試時，在選擇長的大孔的毛細管用于模擬小漏用于依賴液體流動檢漏方法前，建議謹慎選擇。

▼ 其他常見的缺陷創(chuàng)建方法包括插針到包裝壁、放置金屬線、放微絲、或密封表面之間放薄膜、粘附帶孔的薄的金屬板到包裝表面。值得注意的是，這些方法可能展示的氣體、液體、微生物泄漏動力學與實際的缺陷顯著不同，這些方法制備陽性樣品簡單、便宜，可以用于制備大漏孔用來做方法可行性研究和探索方法的檢出上限。

● 關于型式缺陷：型式缺陷是代表實際包裝缺陷的陽性對照，在方法驗證研究中包含型式缺陷很重要，可以用來探索檢漏方法實際應用于檢測實際的包裝失敗和缺陷。

▼ 如膠塞西林瓶包裝：

1）瓶末端通道缺陷；

2）帶蓋膠塞松動；

3）膠塞和瓶之間夾料。

▼ 預灌充注射器：

1）針護套被針刺穿；

2）缺陷的活塞。

▼ 對型式缺陷指明精確的漏孔是沒有意義的或不可行的，因為它們內(nèi)在的不規(guī)則和復雜。型式缺陷更多是定性的、描述性的。因為沒有一個方法可以查找給定包裝的所有可能的缺陷。

▼從型式缺陷搜集到的信息可以用于確定替代方法以檢測或限制關鍵缺陷的發(fā)生，而這些關鍵的缺陷不容易被所選的方法發(fā)現(xiàn)。

● 關于檢漏技術的來源：本章節(jié)所描述的檢漏技術是基于出版在同行評審雜志的相應的研究數(shù)據(jù)，或認可的測試方法標準中的精密度和偏差研究數(shù)據(jù)，當參考標準測試方法（如ASTM）時，建議讀者參考最新的版本。在所有情況下，所引用的方法和文獻研究是為了提供用于制藥包裝檢漏方法開發(fā)和驗證的有用的基準信息。

● 關于檢漏技術：本章節(jié)所描述的技術不是方法，但代表可以用于無菌產(chǎn)品包裝檢漏的測試理念。測試技術根據(jù)它們潛在的檢出限、可靠性、應用有差異，因此，沒有一個方法是通用的適用于所有的產(chǎn)品包裝的檢漏，本章節(jié)提供的信息可以用于測試方法的仔細比較，以便對于給定的狀況可以找到最合適的技術。最終的檢漏方法與給定的產(chǎn)品包裝是特定的。

● 關于檢漏方法分類：檢漏方法被劃分為2類：確定的、概率的，確定的方法是相對于概率的方法，當其他關鍵的方法選擇準則允許時。概率的方法適用于當產(chǎn)品包裝證實與確定的方法不相容，或當方法結(jié)果需要特殊的概率測試方法時。

● 關于檢出限：所選擇的報道的檢出限是根據(jù)文獻來源，以及通?？山邮艿慕?jīng)驗。本信息目的是幫助選擇測試技術，但不應當作為確定的方法性能的陳述對于任何特定的方法應用于任意給定的產(chǎn)品包裝。相反，檢出限和量程應當在方法開發(fā)和驗證過程中建立對于單獨的產(chǎn)品包裝。

▼ 比如，表中檢出限在第6行的方法可能被用戶驗證能夠檢測小至第3行；相反，表中檢出限在第3行的方法可能被用戶確定只能檢測泄漏至第5行。

● 關于表中列舉方法的目的：這套測試技術和提供的信息的目的是幫助而不是限制方法的選擇、開發(fā)、驗證、使用。表中沒列舉的方法，當可以滿足確認和驗證要求并獲得滿意的檢漏結(jié)果時也可以使用。此外，表中列舉的技術可能證明具有更廣泛的應用，超出當前的認知范圍。

關于確定的方法（章節(jié)中表1）：

● 高壓放電法可以對漏孔定位，方法是無損的，盡管建議評估測試暴露對產(chǎn)品穩(wěn)定性的影響。

● 激光法的檢出限與測試之間的時間間隔有關，整個樣品泄漏率的確定通過匯編讀數(shù)和時間的關系來實現(xiàn)。

● 質(zhì)量提取法要求產(chǎn)品必須不能堵塞泄漏通道，整個樣品泄漏率的確定是通過比較測試樣品質(zhì)量流量數(shù)據(jù)與泄漏率標準物質(zhì)和陽性對照的數(shù)據(jù)來實現(xiàn)。

● 壓力衰減要求產(chǎn)品（尤其是液體或半固體）必須不能掩蓋潛在的漏孔。

● 示蹤氣檢測（抽真空模式）要求包裝能夠承受高真空測試條件，且包裝具有有限的示蹤氣滲透。

● 真空衰減要求產(chǎn)品必須不能堵塞泄漏通道，整個樣品泄漏率的確定是通過比較樣品的真空衰減結(jié)果與泄漏率標準物質(zhì)和陽性對照的數(shù)據(jù)來實現(xiàn)。

關于概率的方法（章節(jié)中表2）：

● 氣泡釋放法要求產(chǎn)品（尤其是液體或半固體）必須不能掩蓋包裝表面。氣泡法的檢出限和分析員技能有關。

● 微生物挑戰(zhàn)（浸泡暴露）要求包裝內(nèi)容物具有促生長的培養(yǎng)基或產(chǎn)品，要求在漏孔處有液體的存在以確保方法可靠性。測試時間要數(shù)周。

● 示蹤氣檢測（嗅探模式）檢出限與分析員技能有關，在最佳的測試條件下能測試更小的漏孔。示蹤氣超出泄漏限值指示有漏和漏孔位置。

● 液體示蹤法要求包裝內(nèi)容物也液體示蹤物相容，產(chǎn)品必須不能堵塞泄漏通道。要求包裝能夠承受液體浸泡，且包裝與液體示蹤檢測模式相容。在最佳的測試條件下采用示蹤物化學分析檢測可以測試更小的漏孔。示蹤物遷移測試可以是定量的（通過化學分析，小漏方法）或定性的（通過目視檢測）。測試時間幾分鐘到幾小時。

● 各種方法的泄漏檢出限